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NEWS INFORMATION噬菌体(bacteriophage,phage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称,因部分能引起宿主菌的裂解,故称为噬菌体。本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。噬菌体具病毒的一些特性:个体微小。噬菌体基因组含有许多个基因,但所有已知的噬菌体都是细菌组胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身的生长和增殖。一旦离开了宿主918博天娱乐官网,噬菌体既不能生长,也不能复制。噬菌体分布广,凡是有细菌的场所,就可能有相应噬菌体的存在。在...
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抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的,因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇,所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体,仍是由不同B918博天娱乐官网918博天娱乐官网产生的异质的抗体组成。单抗制备的生产及纯化方法:(1)动物体内生产单抗①成年BALB/c小鼠腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml...
多抗制备方法:当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成918博天娱乐官网会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多918博天娱乐官网抗体。多918博天娱乐官网抗体中不同的抗体分子可以以不同的亲和能力与抗原分子表面不同的部分一抗原决定簇相结合。将抗原导入敏感动物体内后,可刺激网状内皮918博天娱乐官网系统,尤其是淋巴结和脾脏中的淋巴918博天娱乐官网大量增殖。如图所示,实验动物对初次免疫和二次免疫的应答有明显的不同。通常初次免疫应答往往比较弱,尤其是针对于易代谢,可溶性的抗原。注射后大约...
将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示库。噬菌体筛选展示局限性:1、肽库容量受大肠杆菌转化效率影响,容量一般在109,高于此限制的较多基因将难以表达;2、编码多肽的基因带有一定的密码子偏爱性,限制了肽库的复杂度;3、噬...
单抗制备会由于亚918博天娱乐官网918博天娱乐官网生长环境不合适,导致融合918博天娱乐官网染色体丢失,分泌特性改变,亲和力从高变低,这时就需要及时更换培养液,当918博天娱乐官网增长到一定密度的时候,培养基就开始变颜色,影响融合918博天娱乐官网的生长,造成染色体丢失;控制好918博天娱乐官网的密度,密度过大使新加入的培养基不至于很快被消耗,影响融合918博天娱乐官网的生长,造成染色体丢失;不要过于频繁操作918博天娱乐官网,当918博天娱乐官网生长密度不是很大的时候,不要频繁操作,否则918博天娱乐官网容易出现死亡或者生长形态发生明显变化。单抗制备为什么免疫后没有效价或免疫后效价低?(1)设计的抗原与被免疫...
单918博天娱乐官网抗体制备是相对于多918博天娱乐官网抗体而言的。单918博天娱乐官网抗体指由单一的浆918博天娱乐官网918博天娱乐官网所产生的高度均一、仅针对某一抗原表位的抗体。当机体受到抗原刺激后,B淋巴918博天娱乐官网被抗原决定簇激活,增殖分化出大量的浆918博天娱乐官网,而后由浆918博天娱乐官网分泌出特异性抗体。1957年,生物学家伯内特提出了918博天娱乐官网选择学说:动物的每个B淋巴918博天娱乐官网都有其*的受体,在受到外界抗原刺激时,特定的B918博天娱乐官网会发生免疫反应,迅速增殖分化产生相应抗体,抵御抗原的入侵。随后,人们发现无论是在体内的肿瘤918博天娱乐官网还是移植到体外培养的肿瘤918博天娱乐官网都具有无限传代的特点,1...
918博天娱乐官网基因在918博天娱乐官网中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时918博天娱乐官网基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠杆菌是目前应用广泛的蛋白表达系统,其表达外源基因产物的水平远高于其它基因表达系统,表达的目的蛋白量甚至能超过细菌总蛋白量的80%。本实验中,携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BlL21中,在37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基...
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